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          -86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應(yīng)用

          點(diǎn)擊次數(shù):3255    更新時(shí)間:2017-06-01

             隨著超低溫冰箱技術(shù)的不斷發(fā)展,超低溫冰箱在醫(yī)用領(lǐng)域也逐漸被廣泛應(yīng)用。例如-86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應(yīng)用,那就是冰凍切片環(huán)節(jié)中速凍,以減少冰晶形成。

              免疫組織化學(xué)染色中zui常用的一種切片方法,就是冰凍切片。它zui突出的優(yōu)點(diǎn),就是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性,尤其是細(xì)胞表面抗原,更應(yīng)采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。冰凍時(shí),組織中水份易形成冰晶,往往影響抗原定位。一般認(rèn)為冰晶少而大時(shí),影響較小,冰晶小而多時(shí),對(duì)組織結(jié)構(gòu)損害較大,在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。冰晶的大小與其生長(zhǎng)速率成正比,而與成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴(yán)重。因此,應(yīng)盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認(rèn)為冰凍開始時(shí),冰晶成核率較慢,以后逐漸增加,其臨界溫度為-33℃,從-30℃降至-43℃之間,成核率急劇增加達(dá)1018,然后再減慢。基于上述理論可采取以下措施減少冰晶的形成。

          (1)速凍,使組織溫度驟降,縮短從-33℃到-43℃的時(shí)間,減少冰晶的形成。

          其方法有二:

          ①干冰-丙酮(酒精)法:將150-200ml丙酮(酒精)裝入小保溫杯內(nèi),逐漸加入干冰,直至飽和呈粘稠狀,再加干冰不再昌泡時(shí),溫度可達(dá)-70℃,用一小燒杯(50-100ml)內(nèi)裝異戊烷約50ml,再將燒杯緩慢置入干冰丙酮(純酒精)飽和液內(nèi),至異戊烷溫度達(dá)-70℃時(shí)即可使用。將組織(大小為1cm×0.8cm×0.5cm)投入異戊烷內(nèi)速凍30-60s后取出,或置恒冷箱內(nèi)以備切片,或置-86℃低溫冰箱內(nèi)貯存。

          ②液氮法:將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm),如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒(méi)組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi),當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10-20s組織即迅速冰結(jié)成塊。取出組織冰塊立即置入-86℃低溫冰箱貯存?zhèn)溆茫蛑萌牒憷湎淝衅瑱C(jī)冰凍切片。

          -86℃低溫冰箱參數(shù):

          產(chǎn)品系列

          型號(hào)

          容積L

          溫度℃

          內(nèi)尺寸:寬×深×高mm

          外尺寸:寬×深×高mm

          功率W

          凈重Kg

          -86℃
          立式

          TF-86-30-LA

          30

          -25~-65

          270x265x400

          470x490x1120

          200

          60

          TF-86-60-LA

          60

          -25~-65

          364x405x409

          540x620x1115

          240

          75

          TF-86-80-LA

          80

          -40~-86

          380×410×500

          620×660×1275

          450

          80

          TF-86-158-LA

          158

          -40~-86

          380×415×1020

          620×660×1795

          500

          100

          TF-86-328-LA

          328

          -40~-86

          500×500×1300

          760×765×1975

          550

          170

          TF-86-400-LA

          400

          -40~-86

          500×600×1300

          760×865×1975

          650

          190

          TF-86-550-LA

          550

          -40~-86

          600×700×1300

          860×965×1975

          800

          220

          TF-86-638-LA

          638

          -40~-86

          700×700×1300

          960×965×1975

          1000

          250

          TF-86-750-LA

          750

          -40~-86

          800×700×1300

          1060×965×1975

          1200

          280

          TF-86-938-LA

          938

          -40~-86

          1000×700×1300

          1260×965×1975

          1700

          320

          -86℃
          臥式

          TF-86-50-WA

          50

          -40~-86

          440×350×315

          650×560×880

          350

          60

          TF-86-105-WA

          105

          -40~-86

          410×460×550

          1140×760×930

          400

          105

          TF-86-200-WA

          200

          -40~-86

          710×510×560

          1390×760×930

          500

          160

          TF-86-300-WA

          300

          -40~-86

          1010×510×580

          1690×760×930

          600

          180

          TF-86-480-WA

          480

          -40~-86

          1300×600×600

          1990×860×975

          700

          240

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